XPolar®, une technologie brevetée



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La technologie Xpolar® est un mode d'imagerie permettant de mesurer
la biréfringence des échantillons.
La valeur de biréfringence est mesurée en chaque pixel de l'image.


XPolar

Figure 1 : Schéma du microscope XPolar® et de l'interprétation des images Kmax




La mesure XPolar®

Ondes électromagnétiques

La lumière peut être considérée comme une onde électromagnétique (EM),
un exemple de cette onde est présenté Fig. 2.
La polarisation de la lumière [1] représente la direction de l'oscillation
de son champ électrique (en rouge) : La polarisation de l'onde électromagnétique
sur la Fig. 2 est rectiligne.


Figure 2 : Onde électromagnétique se propagent selon l'axe z.

L'intensité à l'illumination est polarisée selon un état de polarisation donné S1.
Deux intensités sont mesurées : I (resp. I) en projetant l'intensité détectée selon
l'état de polarisation parallèle (resp. perpendiculaire) à S1.



Etat de polarisation

L'état de polarisation d'une onde représente
la direction selon laquelle son champ
électrique oscille au cours du temps /
de sa propagation.
Dans le cas d'une onde plane se propageant
selon la direction z dans un milieu linéaire
homogène isotrope et non absorbant, il est
décrit par l'équation d'une ellipse :


Avec : Ex(z, t) (resp. Ey(z, t)) l'amplitude sinusoïdale du champ électrique projeté sur l'axe x (resp. y),
E0x (resp. E0y) l'amplitude à l'origine sur l'axe x (resp. y),
θ la valeur du déphasage entre les deux sinusoïdes Ex(z, t) et Ey(z, t).


Les matériaux biréfringents modifient la valeur du déphasage entre les deux sinusoïdes Ex(z, t) et Ey(z, t).
L'ensemble des états de polarisation peuvent être représentés sur la sphère de Poincaré.
La technologie XPolar® permet de sonder n'importe quel état dans la sphere de Poincaré, avec un
référentiel fixe, c'est à dire sans avoir à changer l'orientation de l'échantillon ou du microscope.
La technologie XPolar® donne une mesure de la valeur de Kmax pour chaque pixel du champ de vision.

Kmax

La valeur de Kmax s'obtient alors avec :


Cette valeur est liée à la biréfringence de
l'échantillon via la relation :

avec θ le déphasage produit par la biréfringence Δn
de l'échantillon d'épaisseur e, à la longueur d'onde λ.

Application : Peau, fibres de collagène


Les collagènes font partie des protéines structurales.
Présents dans la matrice extracellulaire de certains organismes vivants,
ils confèrent aux tissus une résistance mécanique à l'étirement.
Ils sont donc présents en grande quantité dans la peau (Fig. 3a)

Figure 3a : Microscopie fond clair

Figure 3b : Polariseurs croisés

Figure 3c : Technologie XPolar®

Ils présentent également la propriété de modifier l'état de polarisation de la lumière, de manière
intrinsèque ou après l'ajout d'un colorant spécifique. Cette propriété peut s'observer qualitativement
entre polariseurs croisés (Fig. 3b, le collagène apparaissant jaune / rouge), mais cela ne permet pas
de quantifier les éventuelles modifications de l'état du collagène [2].

La technologie XPolar® permet de quantifier la modification de polarisation, au travers d'un nombre
adimensionnel, appelé Kmax (Fig. 3c, représentation en fausses couleurs). Contrairement à
l'imagerie entre polariseurs croisés, ce paramètre n'est pas sensible à l'orientation des fibres de
collagène, il permet donc de s'affranchir des limitations liées à la quantification en microscopie
polarisée classique.

Une modification / vieillissement du collagène va se traduire par une diminution du Kmax mesuré.
Par exemple, le paramètre Kmax permet le suivi d'une dégradation du collagène, ou la
quantification de l'efficacité d'un actif [3].



Application : Cheveux, fibres de kératine


Dans le cadre de l'analyse de cheveux, l'épaisseur de l'échantillon e est inconnue.
De plus, cette épaisseur peut varier partiellement en fonction de la zone d'intérêt.
Comme explicité dans l'équation de la valeur de Kmax, la biréfringence Δn ne peut pas
être dinstinguée de l'épaisseur e avec une mesure de Kmax si un des deux paramètres
est inconnu.


De ce fait, afin d'estimer la biréfringence Δn, nous devons faire une hypothèse concernant
l'épaisseur e de l'échantillon.
Nous utilisons à cet effet une modélisation de l'épaisseur des cheveux basée sur une
approximation circulaire de la section du cheveu :


Avec R le rayon du cheveu.

Nous soustrayons également un cylindre circulaire de rayon r, avec r < R,
représentant le centre du cheveu (la medulla) qui possède une faible biréfringence.
De ce fait, l'épaisseur biréfringente e de l'échantillon, traversée par une lumière en réflexion est :


En utilisant ces deux équations, nous pouvons simuler des images de Kmax pour chaque
couple d'épaisseur de cheveu et de biréfringence, dans le but de déduire la biréfringence
de ce cheveu en comparant la simulation avec la mesure de Kmax réelle.
Toutes ces images simulées sont compilées en abaque (Fig. 4) :


Figure 4 : Abaque (partiel) de biréfringence du cheveu avec des diamètres de 90 et 95µm.
le symbole M13 désigne le modèle d'épaisseur avec une medulla centrale, de rayon r = 13/100 R.

Références :

[1] D. H. Goldstein, Polarized Light, Revised and Expanded. CRC Press, Jun. 2003.

[2] Lattouf, R.et al, "Picrosirius Red Staining: A Useful Tool to Appraise Collagen Networks in
Normal and Pathological Tissues", Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 62(10), 751–758 (2014).

[3] Peno-Mazzarino, L. et al., « The K-probe® imaging system as a new tool to analyze human skin
aging », COMET 2019.

Nos clients témoignent

Cette technologie est d’intérêt pour SILAB, elle apporte de nouvelles capacités d’observation à plusieurs niveaux.

Elle pourrait aider au développement d’actifs cosmétiques

Xavier GAILLARD

Directeur Général Délégué, SILAB

Une technologie très innovante qui s’inscrit dans la tendance actuelle de coupler visualisation et caractérisation physico-chimique. L’appareil K-probe® , ergonomique et performant, nous a permis de mettre en évidence de façon simple, des modifications biologiques habituellement observées par des méthodes plus fastidieuses et plus onéreuses

Laurent PENO MAZZARINO

Directeur Technique Laboratoire, BIOEC

Il va sans dire que la filière parfumerie-cosmétique française a besoin de ce type d’entreprise innovante pour accompagner les laboratoires de recherche, les fabricants d’actifs et les fabricants de produits finis sur les tests d’efficacité des produits proposés et notamment pour la caractérisation du collagène

Directeur de PME

Fabricant d’actifs cosmétiques et matières premières

Vous êtes une entreprise, un centre hospitalier ou un laboratoire clinique ou de recherche, bénéficiez de l’innovation KAMAX.